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菌落计数是临床、食品、乳制品和药物微生物学中获得微生物总数或活菌总数的常用方法。计数细菌菌落(或菌落形成单位)的传统手动方法是劳动密集型和繁琐的过程,需要高浓度水平。菌落计数器是一种实验室设备,它通过帮助快速准确地计数菌落,为这个问题提供了另一种可持续的解决方案。

生物学方法通常依赖于对细菌菌落和细胞的准确计数。菌落计数器用于通过计数琼脂板、载玻片、迷你凝胶或培养皿上的单个菌落来估计液体培养微生物的密度。

کلنی کانتر

菌落计数器应用

典型应用包括 Ames 测试、细菌突变测定和大肠杆菌菌落测定。仪器有多种尺寸和格式,包括可以扫描最大 300 x 300 mm 板的装置,并针对紫外光、白光、荧光和/或绿色荧光蛋白菌落进行了优化。

 计数可以手动完成,通常使用触摸压力和数字计数器,也可以是半自动或全自动的。使用自动计数器,改进的重点是提高精度和准确性,例如在低对比度培养基中检测较小菌落的能力。

反菌落的类型

菌落计数器是一种用于计数在琼脂板上生长的细菌或其他微生物菌落的仪器。有多种菌落计数器可用于帮助快速准确地计数细菌和酵母菌落。其中一些菌落计数器是手动的,而另一些则是自动的。

 Colony Counter手动计数器

手动/半自动计数器取决于技术人员清楚地看到菌落并用特殊类型的笔在板外表面标记它们的能力。该设备会记录此类标记菌落的数量。尽管这种方法有些帮助,但它仍然很耗时、令人困惑且容易出错。

手动计数器菌落计数器的原理 

一种手持式计数器菌落计数器的工作方式是将培养皿放在明亮的电子压力垫上,并通过用笔尖触摸培养板来标记每个菌落。触摸压力在数字显示屏上记录计数。压力可根据需要调整。

 该模型有助于避免错误地丢失或重复计数菌落。还提供用于 50-90mm 板的 Wolfhuegal 标线、分隔盘和中心适配器。

 还有一些附加功能,例如可以为透明菌落提供深色背景、在环境光下以最佳方式观察菌落、无眩光,以及用于计数多个板的内置设施。该软件使用后台开关生成平均数量的菌落和变化。

菌落可能又拥挤又小,使计数变得困难。因此,将计数分成小方块并在安装在柔性臂上的放大镜的帮助下放大菌落会使工作更容易一些。 

这种用于计数菌落的模型允许显着低且耗时的输出。此外,当由一名以上的技术人员计算时,菌落总数可能会有所不同。

自动计数器菌落

Bacteria Colony Counter 自动使用灰度、阈值、过滤等图像处理算法来有效地计数菌落。

自动反菌落原理

全自动菌落计数器使用数字图像捕获设备收集图像,例如文档扫描仪、数码相机、网络摄像头、电荷耦合器件 (CCD) 或视频设备。

. 通过拍摄带有菌落的培养皿的照片,菌落计数自动开始。然后它使用软件包将图像数字化。 

最后一步是数字图像处理,使用单/多阈值分割方法来分离和识别菌落。自动化菌落计数方法有助于节省时间。

 那些没有菌落计数器的实验室可以通过互联网将图像发送到有分析软件的实验室。 

在自动化系统中,对象的对比度和背景的透明度是非常不同的。已选择以下照明方法之一来提高菌落计数的可见性和准确性。

  • 转移方式:适用于背景相对透明的普通高对比度物体。
  • 暗场法:适用于背景不透明的高对比度物体。
  • 反射:用于对比度低且背景相对透明的物体。

具有 1.4 兆像素 CCD 的现代仪器可以捕获 HD(高清晰度)彩色图像。同样,典型的自动菌落计数器由长寿命的红色、绿色和蓝色 LED 组成,这有助于获得具有鲜明对比度且无色差的良好彩色图像。

 黑色、白色和透明背景可用于样品平台的有效明场和暗场曝光。

可以使用 55-150 mm 圆板和 150 mm x 150 mm 方板。它可以测量小至 43 µm 的菌落或精度为 0.1 mm 的区域。 

没有反射和阴影的培养皿很难照亮,因为它们是透明和反光的。多次曝光会在琼脂边缘产生可能算作菌落的伪影。

 导致计数不准确,影响仪器的准确性。Interscience for Microbiology 开发了一种白色漫射圆顶,用于 360 度无反射和阴影的光线,以克服该问题。他们的 Scan® 4000 型号具有此功能。 

使用自动计数器菌落的优点

自动菌落计数器有很多优点。他们之中有一些是:

  • 拍摄带有菌落的培养皿只需不到 10 秒的时间,软件会对其进行快速分析。因此,减少了计数所需的时间。 
  • 随着软件对菌落进行计数,它提高了准确性并减少了人工劳动。
  • 计算多页变得毫不费力。

来源:https://microbeonline.com/colony-counter/

 

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